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형광면역분석_PCR

DNA & RNA * 본문에 사용되어진 그림 출처: THE DOUBLE HELIX_제임스 왓슨 DNA & RNA 분석을 위한 X-선 회절 더보기
Fluorescence Fundamentals & PCR Gene Channels 참고 : Roche - Light Cycler 참고 : BIO-RAD LABORATORIES INC 참고 : Rotor-Gene Q. https://www.qiagen.com/us/service-and-support/learning-hub/molecular-biology-methods/pcr/ 부분 수정 더보기
PCR(Polymerase chain reaction) 중합효소 연쇄반응 • 중합효소 연쇄반응 과정 (1) DNA denaturation (2) Annealing(primer의 결합) (3) Extension (DNA 합성) -DNA Denaturation : 자연상태에서 두 가닥으로(double strand) 되어 있는 DNA를 고온(95℃)에서 한 가닥으로 분리(변성) -변성된 단량체(single-tranded)의 DNA를 낮은 온도(50~60℃)에서 Primer(1)와 결합 -72~75℃에서 Polymerase(2)가 Primer로부터 DNA를 합성하는 세 단계를 반복적으로 시행함으로써 증폭된 DNA를 얻어 분석하는 방법 (1)DNA 복제가 일어날 때 상보적인 염기 서열이 새로 만들어지는 시작이 되는 짧은 조각. (2)단량체를 결합시켜서 중합체를 형성하는 효소. • PC.. 더보기
형광면역분석(PCR)을 위한 핵산 추출 방법 * 코로나19 검사 방법 의심 환자의 침이나 가래 등 가검물 채취 => 핵산(RNA) 추출 => PCR 검사 * 핵산 추출 방법(Nucleic acid extraction methods) 출처 : https://m.blog.naver.com/sml-meditree/221722169513 발췌 및 수정 ● 세포로부터 핵산을 추출하기 위한 방법 1. 페놀 추출법 세포를 포함하는 시료를 SDS나 프로테이나아제 (proteinase) K로 처리하여 가용화한 후 페놀로 단백질을 변성 제거하여 핵산을 정제하는 방법. => 페놀 추출법은 여러 단계를 포함하여 시간이 많이 소요되며, 핵산 추출 효율은 작업자의 노련성에 따라 크게 좌우된다. 2. 컬럼을 이용한 키트(핵산 추출의 기본) 핵산과 특이적으로 결합하는 실리카나.. 더보기
형광면역분석(법)/fluorescence immunoassay 일종의형광반응으로 Sample 형광 물질이 특정 파장의 빛을 흡수하면 형광 물질의 분자가 여기(excitation)되었다가, 다시 원래의 상태로 돌아오면서 흡수한 빛과는 다른 파장(emissino)의 빛을 내는 반응. * 레이저, LED 등에 적용되는 원리와 유사 Fluorescence Fundamentals 출처 : https://www.thermofisher.com/kr/ko/home/references/molecular-probes-the-handbook/introduction-to-fluorescence-techniques.html Fluorescence quantum yields (QY) and lifetimes (τ) for Alexa Fluor dyes. https://www.thermofi.. 더보기